直击考纲1基因工程的诞生Ⅰ。2基因工程的原理及技术含PCR技术Ⅱ。3基因工程的应用Ⅱ。4蛋白质工程Ⅰ。5植物的组织培养Ⅱ。6动物细胞培养与体细胞克隆Ⅱ。7细胞融合与单克隆抗体Ⅱ。8动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础Ⅰ。9胚胎干细胞的移植Ⅰ。10胚胎工程的应用Ⅱ。11转基因生物的安全性Ⅰ。12生物武器对人类的威胁Ⅰ。13生物技术中的伦理问题Ⅰ。14简述生态工程的原理Ⅱ。15生态工程的实例Ⅰ。
考点29
基因工程、蛋白质工程和细胞工程
1．基因工程常考的3种基本工具1限制性核酸内切酶：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。2DNA连接酶：①EcoliDNA连接酶只能连接黏性末端；②T4DNA连接酶能连接黏性末
f端和平末端。3载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段基因插入其中；③具有特殊的标记基因以便对含目的基因的受体细胞进行鉴定和选择。2．基因工程的4大操作程序1目的基因的获取①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增a．原理：DNA双链复制。b．条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。
③用化学方法直接人工合成。2基因表达载体的构建①基因表达载体模式图
②基因表达载体的构建过程
3将目的基因导入受体细胞①导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。②导入动物细胞：显微注射技术。③导入微生物细胞：感受态细胞法用Ca2处理。
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f4目的基因的检测与鉴定①插入检测：DNA分子杂交技术。②转录检测：DNARNA分子杂交技术。③翻译检测：抗原抗体杂交。④个体水平检测：抗性接种实验。3．图解记忆蛋白质工程
4．比较记忆植物组织培养与动物细胞培养项目取材植物组织培养植物幼嫩部位动物细胞培养动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
过程
结果条件
获得植株个体，可以体现全能性①无菌；②营养；③适宜条件
新的细胞，不形成个体，不体现全能性①无菌、无毒；②营养、血清等；③温度和pH；④气体环境：O2、CO2
5植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较步骤第一步第二步第三步第四步相同点植物体细胞杂交过程原生质体的制备酶解法原生质体融合物理、化学法杂种植株的筛选与培养杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体制备过程正常小鼠免疫处理动物细胞融合物理、化学、生物方法杂交瘤细胞的筛选与培养单克隆抗体的提纯
①两种r