植物组织培养实验报告
摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无菌
操作。实验结果显示第2组即MS6BA（20mgLNAA10mgL和第3组即MSKT（05mgL24D10mgL培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈
伤组织诱导组合。
关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织
1材料与方法
11实验材料：大豆子叶
12实验试剂与仪器
（1）试剂：75酒精、MS干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂（NAA、2，4D、
KT、6BA）、无菌水、升汞、NaOH溶液（2）仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁
置架、烧杯、电炉。
13实验方法
131培养基的配制与灭菌
1311配制培养基的准备阶段
（1）准备80个培养试管及封口膜，2个小培养皿、1个大培养皿，用洗衣粉、
自来水洗净，再用蒸馏水把每个培养试管、润洗一下。带晾干后将试管编号180；
（2）在称量纸上用百分之一天平分别称取15g琼脂4份，75g蔗糖4份，在
烧杯里用千分之一天平上称取1185gMS干粉4份（烧杯不要清洗）；（3）剪小圆纸片40张，均分在两个小培养皿中大小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片10张，均分在两个大培养皿中。然后分别用报纸包好。（4）把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。
1312配制培养基
（1）在装有MS干粉的烧杯中按下表加入植物生长调节剂
实验所用的所有激素浓度均为05mgmL
编号培养基配置
激素的加样量ml6BANAAKT24D
MS6BA
1
（10mgLNAA05mgL
05025
MS6BA
2
（20mgLNAA10mgL
1005
3
MSKT（05mgL24D10mgL
02505
4
MSKT（10mgL24D20mgL
0510
（2）用量筒量取250ml（稍多）蒸馏水，取一个不锈钢杯子加入150ml蒸馏水
f和称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾2mi
，再加入混合好的MS培养基1号和蔗糖，混合沸腾2mi
，用剩余的蒸馏水定容至250ml；（3）当温度降到60℃左右时，将溶液pH调至58，一般加4滴NaOH溶液即可；（4）取编号120的培养试管，用大量注射器以每瓶125ml左右培养基分装在培养试管中，用封口膜封口，4支一捆捆扎好。（5）用相同的方法配置24号培养基，并分装、捆扎。1313高压湿热灭菌（1）将包好的接种工具，包好的培养皿，以及分装好的试管一起放到高温灭菌锅中用二次排气法在121℃灭菌20mi
。（2）高压灭菌锅操作
先关闭高压灭菌锅放气r