免疫组化操作步骤
、仪器设备（一）仪器设备、118cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉不锈钢高压锅或电炉或用微波炉2水浴锅、试（二）试剂、1PBS缓冲液（ph72—74）缓冲液（：NaC137mmolL，KCl27mmolLNa2HPO443mmolLKH2PO414mmolL）：，2．001molL柠檬酸钠缓冲液（CBph601000ml）柠檬酸三钠3g柠檬酸04g。．柠檬酸钠缓冲液（：柠檬酸三钠柠檬酸）：。3．05molLEDTA缓冲液（ph80）．缓冲液（：700ml水中溶解1861gEDTA82262H2O用10mmolLNaOH调至ph80加水至1000ml）：用加水至41molL的TBS缓冲液（ph80）在800ml水中溶解121gTris碱，用1N的HCl调至ph80加水1000ml。缓冲液（：在）：。5酶消化液：a01胰蛋白酶：用01CaCl12ph78配制。b04胃蛋白酶液：用01N的HCl配制。酶消化液：胰蛋白酶：配制。胃蛋白酶液：配制。胰蛋白酶配制胃蛋白酶液63甲醇甲醇—H2O2溶液：用30H2O2和80甲醇溶液配制溶液：甲醇甲醇溶液配制7风裱剂：a甘油和05mmolL碳酸盐缓冲液（ph9095）等量混合b油和TBSPBS配制风裱剂：碳酸盐缓冲液（风裱剂）配制8．TBSPBSPH9095适用于荧光纤维镜标本．适用于荧光纤维镜标本ph7074适合光学纤维标本适用于荧光纤维镜标本、操作流程（三）操作流程、1、脱蜡和水化：脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。、脱蜡和水化：分钟。℃a组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟更换二甲苯后在浸泡10分钟分钟更换二甲苯后在浸泡b无水乙醇中浸泡五分钟c95乙醇中浸泡五分钟乙醇中浸泡五分钟d75乙醇中浸泡五分钟乙醇中浸泡五分钟2、抗原修复：用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片：、抗原修复：用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片：A抗原热修复a高压热修复在沸水中加入EDTAph80或001m枸橼酸钠缓冲溶液（ph60）盖上不锈钢锅盖，但不能锁定。将玻片置于金枸橼酸钠缓冲溶液（盖上不锈钢锅盖，或）盖上不锈钢锅盖但不能锁定。属染色加上，缓慢加压，是玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。分钟后除去热源，置入凉水中，属染色加上，缓慢加压，是玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后除去热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。b沸热修复电炉或水浴锅加热001枸橼酸钠缓冲液（ph60）至95℃r