进行角膜麻醉。静脉注射虎红20mgkg1,体积1mLkg1,1mi
后在手术前置镜与离体定位仪介导下进行冷激光照射视网膜静脉,制备RVO模型。照射位置距离视盘颞侧2个视盘直径距离,照射范围为直径1mm内的视网膜静脉区域。冷激光参数:波长532
m,光照直径1mm,光强度50mW,照射时间120s。采用多普勒流量计测定每只大鼠对应眼球造模前基础血流量值,以及造模后1h流量值,以流量较基础值下降50以上为栓塞造模成功。假手术组不注射虎红,只进行冷激光照射处理,其他操作与模型组相同。22分组及给药大鼠随机分为6组,每组15只,分别为假手术组、模型组、血塞通低、中、高剂量组(20,40,80mgkg1)以及葛根素阳性药组(40mgkg1),血塞通和葛根素40mgkg1剂量相当于受试药的临床等效剂量。采用尾静脉缓慢注射给药的方式,给药体积均为4mLkg1,每天1次,连续7d。假手术组和模型组给予等体积生理盐水。23视网膜血流量测定所有大鼠造模前(基础值)、造
f模后1h,以及给药7d后,采用多普勒流量计测定对应眼球的视网膜栓塞区域的血流量。24组织病理学观察实验结束后,每组5只动物取病变眼球,置4甲醛固定,石蜡包埋,制作石蜡切片,沿眼球矢状面切片,厚度5μm,用苏木精伊红(HE)染色,采用显微镜进行病理学观察。25血塞通成分靶点网络构建从PUBMED(http:www
cbi
lm
ihgovpubmed)文献数据库中检索与RVO相关的基因及血塞通主要成分(人参皂苷Rg1,Rb1,Rd,Re和三七皂苷R1)对这些基因的作用,建立血塞通的成分靶点网络,分析血塞通抗RVO的可能靶点和作用机制。26血塞通作用靶点验证取各组大鼠病变眼球玻璃体液,ELISA法测定每只大鼠玻璃体液中IL1β,IL6和VEGF含量。27统计学处理所有数据均±s表示,2组间比较用stude
t′sttest,P005为差异有统计学意义。3结果31对视网膜静脉血流量的影响假手术组造模前后血流量较为稳定,模型组及各给药组造模后血流量明显下降,约为基础值的246,与假手术组比较差异有显著性意义(P7。32对病理组织学的影响HE染色病理切片
在光镜下观察,假手术组视网膜组织结构正常,10层结构清
f楚,内核层及外核层细胞排列整齐规则,色素上皮细胞以及微血管网密度均匀。模型组视网膜严重水肿,视神经纤维层、内网层及视杆锥层明显疏松、水肿、结构紊乱,内核层和外核层细胞间明显水肿、疏松,细胞肿胀、排列明显紊乱,视网膜增厚显著。视网膜微血管出现血栓甚至闭塞,周细胞数目明显减少。r