细菌的芽孢染色
姓名：俞华军班级班级：09生科三班学号学号：200900140157日期日期：20101029姓名组别：四同组者同组者：谢英健余振洋岳永胜张刚刚组别
一．实验目的
1．学习并掌握细菌的芽孢染色法。2．了解并观察细菌芽孢的结构和形态。
二．实验原理
芽胞又称内生孢子，能否形成芽孢及芽孢的形状、芽孢在孢囊的位置、芽胞芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。芽胞壁厚，透性低，不易着色，一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色（芽胞呈无色透明状），而一旦染上色后又难以脱色。胞染色法：芽胞染色法：根据芽胞特点设计，除了用着色力强的染料外，还需要加热，以促进芽胞着色。当染芽胞时，菌体也会着色，然后水洗，芽胞染上的颜色难以渗出，而菌体会脱色。然后用对比度强的染料对菌体复染，使菌体和芽胞呈现出不同的颜色，因而能更明显地衬托出芽胞，便于观察。
三．实验器材
、梭状芽孢杆菌（中部膨大）。1．菌种：枯草芽孢杆菌（芽孢位于菌体中央）菌种溶液和试剂：5孔雀绿水溶液、05番红水溶液、二甲苯、香柏油、蒸2．溶液和试剂馏水、95乙醇。器材：显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸。3．器材
四．实验步骤
1．制片取一块载玻片，在中央滴一滴蒸馏水，用接种环无菌操作从枯草芽孢杆菌（梭状芽孢杆菌斜面上挑数环菌置于载玻片液滴上，小液滴呈混浊状即可。并按常规方法干燥、固定（每隔几秒在酒精灯火焰上过一遍）。2．加热染色向载玻片滴加数滴5孔雀绿水溶液覆盖涂菌部位，用夹子夹住载玻片在微火上加热至染液冒蒸汽（此时开始计时）并维持5mi
，加热时注意补充染液，切勿让涂片干涸。3．脱色带玻片冷却后，用缓流自来水冲洗至流出水无色为止。4．复染用05的番红水溶液复染15mi
。5．水洗用缓流自来水冲洗至流出水无色为止。6．镜检带载玻片自然干燥后（可在酒精灯火焰上每隔几秒过一遍）油镜镜检，观察芽孢的形态并绘图。
f五．实验结果记录
10×100（油镜）枯草芽孢杆菌10×100（油镜）
10×100（油镜）梭状芽孢杆菌10×100（油镜）
f表一细菌形态记录表
项目菌种枯草芽孢杆菌梭状芽孢杆菌
芽孢形状
椭圆或柱状圆形或卵圆形
芽孢着生位置
位于菌体中央或稍偏
位于菌体中央，极端或次极端
芽孢囊形状
圆形不膨大膨大
六．思考题
1．为什么芽孢染色法需要进行加热？能否用简单染色法观察到细菌芽孢？．为什么芽孢染色法需要进行加热？能否用简单染色法观察到细菌芽孢？答因为与正r