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植物甾醇酯的高效液相色谱分析
作者：张秋丰来源：《学园》2013年第34期
【摘要】本文研究了植物甾醇酯、植物甾醇和脂肪酸酯的定性、定量分析方法。采用正相高效液相色谱法，紫外检测器，结果表明：三种物质10mi
内出峰，分离效果好，此方法快速、准确、简便。【关键词】植物甾醇植物甾醇酯高效液相色谱【中图分类号】G642【文献标识码】A【文章编号】16744810（2013）34004802游离植物甾醇在油脂中溶解性较差，在体内很难被吸收利用，造成使用上的困难。与植物甾醇相比，植物甾醇酯具有更优的亲脂性和更佳的降胆固醇效果，是一种新型功能性食品添加剂。目前，国内外的少数厂家已能使用植物甾醇等原料合成植物甾醇酯，对于合成过程中跟踪检测的分析方法却未见报道。一仪器与试药Agile
t1100型液相色谱仪，Agile
t1100型紫外检测器；电子天平；梅特勒托利多。植物甾醇酯对照品购于cog
is生物制品有限公司，经HPLC测定纯度为9531，所用试剂均为色谱纯。二实验方法1对照品溶液的制备称取Cog
is甾醇酯（95）对照品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mgmL的对照品溶液，摇匀，经045m微孔滤膜过滤，即得对照品储备液，备用。2样品溶液的制备向装有温度计的250mL四口烧瓶中加入一定量的植物甾醇和脂肪酸甲酯，油浴加热，机械搅拌，温度达到90℃后继续反应1h，再加入一定量的甲醇钠，而后恒温反应4h，最后将热的反应液转入漏斗中，经水洗、乙醇洗涤，脱溶剂后得到样品。称取合成样品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mgmL的样品溶液，摇匀，经045m微孔滤膜过滤，即得样品储备液，备用。
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3色谱条件色谱柱：硅胶正相柱（250mm×46mm，5μm）；流动相：正己烷∶异丙醇∶甲醇98∶2∶15；流速：1mLmi
；检测波长：210
m；进样量：20μL。4线性关系考察吸取对照品储备液1、2、4、6、8mL，分别置于10mL容量瓶中，使用流动相定容，摇匀，得到5个不同浓度的对照品溶液。分别吸取20L，按上述色谱条件进样分析。以浓度X（gmL）为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线并计算回归方程。回归方程为：Y187269X29637，r09987。结果表明：甾醇酯在01～08mgmL的浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。5精密度试验吸取上述标准对照品溶液中的06mgmL20L，按上述色谱条件，重复进样5次，测得甾醇酯峰面积的RSD为129。6稳定性试验取04mgmL对照品溶液，分别于0、2、6、12、24h，吸取20L进样，r