的免疫程序，儿童出生后第3个月开始初免，全程免疫3针，保护率可达90％以上，第二年再加强一针。
附录A标准的附录百日咳病原学诊断方法
A1病原体分离从病人鼻咽部采集标本或咳碟法分离病原体。A11标本的采集A111咳碟法用咳碟法采集样品时，应在病人咳嗽时，将包－姜Bordet－Ge
gou二氏培养平板打开放在病人口前10cm处，使病人对准平板表面咳嗽数次，直接收集病人咳出的飞沫。然后盖好平皿盖送检。平皿暴露时间以15s为宜。A112鼻咽试子由于百日咳多发于儿童，所以采样时，病儿的头部斜依于母亲的胸怀，母亲以双手固定病儿的头部，医师以右手执棉拭子，左手按病人的头顶部，使顶端稍向下弯的棉拭子自前鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待棉拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，将棉拭子稍留片刻，以待反射性咳嗽，然后轻轻旋转一周，缓缓取出棉拭子。A12接种和菌种检定A121菌型百日咳杆菌应为革兰氏阴性呈卵圆形短小杆菌，菌体长05～10μm。A122菌落百日咳杆菌接种于包－姜二氏培养基37℃培养3～4d后其菌落呈圆形、灰白色，表面光滑，中央突起，边缘整齐，具有珍珠般的光泽，菌落周围有弥散性溶血环。A123生化及抗原特性百日咳杆菌生化反应极不活跃，不发酵任何碳水化合物，不液化明胶，不产生硫化氢，不形成吲哚，不还原硝酸盐，不利用枸橼酸盐，氧化酶阴性，70％以上菌株触酶阳性。不产生尿素酶和苯丙氨酸脱氨酶。百日咳杆菌新分离菌株有荚膜，毒力强，菌落光滑，称为I相菌。百日咳杆菌有6种凝集因子，1、2、3因子是主要的，籍此又可将I相菌分为三种血清型：12，13，123。血清型具相对稳定性，但可发生变异。血清型不仅在自然感染，在人工传代培养过程中也可发生变
f异。A2皮肤坏死试验A21每次试验最少用健康家兔或豚鼠2只，每只家兔或豚鼠可同时试验数个菌株。A22将培养40～48h第三代或第四代20％羊血包－姜二氏培养基上的菌苔，混悬于缓冲盐水或生理盐水中。A23将菌液用灭菌脱脂棉过滤，测定浓度。A24用生理盐水将菌液稀释成4×10上标始8上标终mL及2×10上标始8上标终mL二个浓度。A25试验前一天将健康家兔或豚鼠先行脱毛。A26注射前用75％酒精消毒，再用小试管蘸色素印在脊柱两侧、每只家兔可试验4个菌株。A27每个圈内皮内注射01mL，拔针时要在皮内稍稍扭转以免菌液流出。A28注射完毕要做好记录。A29注射后48～72h观察坏死情况，并量坏死的大小。如两只家r