DNA复制、转录、翻译以及PCR技术比较
二、在基因过程的各种检测和鉴定
1、标记基因为了检测目的基因目的基因表达载体是否导入受体细胞
2、用DNA分子杂交法检测目的基因是否插到染色体DNA上工具基因探针
3、用DNA分子杂交法检测目的基因是否转录出mRNA工具基因探针
4、用抗原抗体杂交法检测mRNA是否翻译出蛋白质
5、鉴定个体水平鉴定比如抗虫实验。
DNA复制细胞内复制
转录
翻译
PCR技术体外DNA复制技术概念
DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程复制的结果是一条双链变成两条一样的双链如果复制过程正常的话每条双链都与
原来的双链一样
DNA分子首先解开双链以DNA的一条链为模板按照碱基互补配对原则合成RNA
的过程
以mRNA为模板以tRNA为运载工具合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质
的过程
PCR技术是一项在生物体外复制特定
DNA片段的核酸合成技术。
场所细胞核、线粒体、叶绿体细胞核、线粒体、叶绿体
细胞质核糖体
体外
原料4种游离脱氧核苷酸4种游离核糖核苷酸
20种游离氨基酸
4种游离脱氧核苷酸
模板DNA分子中的两条链
DNA中的一条链
mRNA
目的基因或目的基因的两条链
酶解旋酶、DNA聚合酶等DNA连接酶
解旋酶、RNA聚合酶等
不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等
耐热DNA聚合酶Taq酶能量ATP
ATP
ATP
不需要ATP能量来自外界加热过程
1、解旋在解旋酶作用下利用ATP释放的能量解开双螺旋
2、在DNA聚合酶的作用下按照碱基互补配对原则把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接
3、沿着模板链不断延伸最终形成
两个一模一样的DNA分子。
1、解旋在解旋酶作用下利用ATP释放的能量解开双螺旋
2、以解开的一条DNA链为模板按碱基互补配对原则游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对
3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成
RNAmRNAtRNArRNA
mRNA从核孔进入细胞质与核糖体结合从起始密码子AUG开始翻译。tRNA一端携带氨基酸进入核糖体另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对两氨基酸间形成肽键。核糖体继续沿mRNA移动每次移动一个密码子至
终止密码结束肽链形成
1、变性即加热至高温使得目的基因的双链打开解旋但不需要解旋酶
2、退火复性降温使得解开的两条链分别与引物结合
3、延伸在Taq酶的作用下按碱基互补配对原则脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复上述三步就能获得大量的目的基因。模板去向复制后模板链与新形成的子链形成双
螺旋结构
转录后模板链与非模板链重新形成双
螺旋结构分解成r