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提取25分钟,连续提取两次,过滤,合并滤液,减压浓缩;第三次加10倍50乙醇,超声提取25分钟,连续提取三次,过滤,合并滤液,减压浓缩。第四次加10倍50乙醇,超声提取25分钟,连续提取四次,过滤,合并滤液,减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中绿原酸含量并计算绿原酸收率。212加醇倍数取原药材,除去杂质,筛去灰屑,至于圆底烧瓶内,分别提取四次,第一次加14倍50乙醇,超声提取25分钟,连续四次,第二次加12倍50乙醇,超声提取25分钟,连续四次,第三次加10倍50乙醇,超声提取25分钟,连续四次,第四次加8倍50乙醇,超声提取25分钟,连续四次,分别过滤,合并滤液,减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中绿原酸含量并计算绿原酸收率。213提取时间取原药材,除去杂质,筛去灰屑,至于圆底烧瓶内,分别提取三次,第一次加10倍50乙醇,超声提取25分钟,连续四次,第二次加10倍50乙醇,超声提取35分钟,连续四次,第三次加10倍50乙醇,超声提取45分钟,连续四次,分别过滤,合并滤液,减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中绿原酸含量并计算绿原酸收率。22正交试验设计实验结果表明,提取次数、加醇倍数和提取时间对绿原酸收率影响较大。选择提取次数、加醇倍数和提取时间作为考察因素,采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平,用L9(34)正交表进行试验,因素水平表见表1。3含量测定31色谱条件:依据查阅文献及考查的结果,确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦Cl8规格为(46mm×250mm,5μm);流动相以乙腈04磷酸溶液(13:87)(三乙胺调pH值至30);检测波长为327
m;流速10mLmi
1;柱温:35℃。理论板数按绿原酸峰计算应不得低于2000。32供试品溶液的制备取提取膏适量,精密量取,置50mL量瓶中,加50乙醇适量,超声处理十分钟,放置至室温,加50乙醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(045μm)滤过,即得。33对照品溶液的制备
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分别精密称取绿原酸对照品5mg,置250mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。34标准曲线的制备将浓度为5μgml,10μgml,15μgml,20μgml,25μgml,30μgml,35μgml的对照品溶液分别吸取20μL注入HPLC,以进样量(μg)为横坐标,峰面积积分值A为纵坐标,绘制标准曲线。试验表明,绿原酸铵对照品在5~35μgml范围内线性关系良好。35回收率试验取已知含量的同一批供试品各6份,分别精密添加一定量的绿原酸对照品,测定r
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