的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。考点细化:①目的基因的获取方法为根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在载体上的位置、基因的转录产物、以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。②基因文库、基因组文库、cDNA文库的区别:含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌体分别含有这种生物的不同基因,称之为基因文库。如果含有一种生物所有基因,叫做基因组文库。只包含一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,如cDNA文库。③基因重组操作中构建基因表达载体的目的是将目的基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代,同时目的基因能够表达和发挥作用。④一个完整的基因表达载体包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因。⑤将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的常用方法分别是脓杆菌转化法、显微注射法、Ca2处理法。⑥基因工程的受体细胞选择,植物可以采用体细胞,动物不能用体细胞,一般采用受精卵细胞。因为受精卵具有全能性。⑦当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2处理细胞,这样做的目的
f是使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA分子的感受态细胞。⑧目的基因的检测:转基因生物的DNA是否插入了目的基因(DNA分子杂交技术);目的基因是否转录出了mRNA(分子杂交技术);目的基因是否翻译成蛋白质(抗原抗体杂交);个体生物学水平鉴定。⑨目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因的检测和表达一般需要碱基互补配对。将目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对3基因工程的应用(5)在农业生产上:主要用于提高农作物的抗逆能力(如:抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。(6)基因治疗不是对患病基因的修复,基因检测所用的DNA分子只有处理为单链才能与被检测的样品,按碱基配对原则进行杂交。4蛋白质工程(7)蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成,对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质二、克隆技术1植物的组织培养(1)细胞工程:指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或者细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上
f改变细胞的遗传物质,属于细胞工程。(2)细胞全能性:r