免疫组化步骤
一般的sp法步骤啊，具体如下：1、烤片，68℃，20分钟，2脱蜡：依次将载玻片放入二甲苯二甲苯100酒精100酒精95酒精90酒精80酒精70酒精，起脱蜡作用的主要是二甲苯依据的是相似相溶的原理一般在每个试剂中放10mi
天气热可以少放几分钟相反天气较冷的话就要适当延长脱蜡时间一般为1215mi
3抗原修复：脱蜡后在清水中冲洗一段时间，加入3H2O2甲醇溶液浸泡10mi
，从而除去内源性的过氧化氢酶，然后倒掉H2O2，在清水中洗两次，再加入柠檬酸缓冲液，放入微波炉中蒸煮3mi
（中火），一般刚到沸腾即可，冷却至室温，然后再蒸煮一次，冷却至室温，蒸煮的目的是为了使抗原的位点暴露出来。4血清封闭：冷却至室温后，将柠檬酸缓冲液倒掉，水洗2次，并将载玻片置于PBS中5mi
，洗2次，擦干组织周围的PBS液，马上加上血清，使一些非特异性的位点封闭起来，然后放入37°C温箱中半小时。血清稀释10倍（900lPBS：100l血清封闭液）。5加一抗：将温箱中的载玻片取出，用吸水纸擦干载玻片反面和正面组织周围的血清，不洗，加一抗，如果做对照实验，就在对照的组织上加PBS。加完一抗后于4°C冰箱中保存过夜≥18h。6加二抗：将载玻片从冰箱中取出，4℃过夜后在37℃复温45分钟，放入PBS中洗3次，每次5mi
，擦干组织周围的PBS后加上二抗然后置于37°C温箱中半小时。7加SABC将片子从温箱中取出放入PBS中洗3次，每次5mi
，擦干组织周围的PBS后加上SABC然后置于37°C温箱中半小时。SABC稀释100倍（990lPBS：10lSABC）。8加显色剂：将片子从温箱中取出放入PBS中洗3次，每次5mi
，擦干组织周围的PBS后加上显色剂。（显色剂的配置：在1ml水中加1滴显色剂A，摇匀，然后加1滴显色剂B，摇匀，再加1滴显色剂C，摇匀）A：DABB：H2O2C：磷酸缓冲液9复染：将显色后的片子用清水冲洗一段时间后，浸泡于苏木精中染色，一般动物组织为半分钟，植物组织35mi
。然后盐酸酒精分化。10脱水：将复染后的片子置于水中冲洗后，依次将载玻片放入70酒精80酒精90酒精95酒精100酒精100酒精二甲苯二甲苯。每个试剂中放置2mi
，最后浸泡在二甲苯中，搬到通风柜中。11封片：用中性树胶滴在组织旁边，再用盖玻片盖上，要先放平一侧，然后轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好片子后置于通风柜中晾干。
免疫组化技术要点
1固定最好用4的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液r