能性及安全性等指标。建立
多样性的非整合地贫iPS细胞库。
利用基因重组技术修复突变基因。基因修复后iPS基因组及表观遗传学稳定性的研究。通过基因芯片的技术手段检测基因修复后iPS的SNP，CNV等代表基因组稳定性的指标。并进行外显子测序Exo
Seque
ci
g来确定有无重要基因发生突变等。利用CHIP结合高通量测序技术确定经体外基因修复后的iPS在组蛋白修饰，DNA甲基化等表观遗传方面的稳定性。
基因修复后iPS多能性的维持。研究经体外基因操作后，iPS维持其多向分化潜能的能力。通过非定向的分化手段如裸鼠体内畸胎瘤的形成，体外类胚胎（EB）的形成等手段对比基因修复前后地贫iPS的分化潜能。并通过定向分化的方式如，神经分化，血液分化等对比探讨iPS在基因修复过程中的多能性维持。
4、iPS功能性血液分化的研究及基于动物模型的功能评价。
利用与不同人造血组织来源的的基质细胞，包括间充质干细胞共培养系统，优化建立iPS的功能性血液分化及造血干、祖细胞体外扩增实用性技术。建立基于动物模型的造血干细胞分化，移植及安全性多功能的评价技术和指标。
采用不同造血组织来源人间充质细胞与人胚胎干细胞及iPS细胞共培养诱导造血分化，与目前较常用的EB形成及小鼠或其它组织来源的基质细胞共培养体系进行诱导效率的比较，筛选有效提高造血干细胞诱导效率的iPS细胞分化培养条件。
利用体外细胞长周期培养、单细胞培养分化实验以及体内NODSCID鼠造血重建实验、骨髓竞争移植实验等，与脐带血HSC细胞比较，评价多种来源的iPS分化来源的HSCHPC体内定向归巢、造血重建等生物学功能。比较iPS细胞来源的造血干细胞与脐血造血干祖细胞向造血各系细胞分化，尤其是红系分化能力，并对
f相应的调控机制进行探讨，侧重研究W
t3a、PGE2等分子的调控作用。通过全基因组表达及表观遗传学分析，比较地中海贫血iPS细胞来源的造血
干细胞与几种体内分离的造血干祖细胞，尤其是脐带血造血干祖细胞在编码及非编码RNA基因表达，DNA甲基化及组蛋白乙酰化等方面的差异，并用实时定量PCR加以验证。根据实验得到的结果，选择20－30个目的基因进行干预，研究候选基因对造血干细胞细胞增殖，多能性和分化潜能等功能的影响。
比较不同来源的间充质干细胞（MSC）作为滋养层细胞并辅以不同细胞因子的混合培养体系对iPS诱导获得的HSCHPC细胞体外扩增的作用，建立可以保持HSCHPC细胞多能性功能并显著提高干细胞数量的培养条件，以满足临床移植应用的要求。
f二、预期目标
总体目标：
由于遗传导致的β地中海贫血是严r