得稀释之前样本的浓度为79945gL误差:(79945348)348100%12973误差分析:①抗原抗体反应需要一定孵育时间和温度,而操作中由于加样的速度限制,无法严格控制各管的反应时间;本次制作标准液时量极小,很有可能出现未混匀、挂壁的情况;标准液吸取量小会导致移液枪的误差被放大。②免疫比浊法的基本原理是基于抗原抗体结合,而这个结合反应有特殊性,只有在一定范围浓度中,两者比例合适时检测结果才准确,否则会产生带现象,已有文章表明,稀释前后检测结果偏差很大朱爱萍郭书云赵锐免疫比浊法检测异常血清免疫球蛋白的方法学探讨J现代检验医学杂志199943334,所以我认为此样本虽然是由原液稀释三倍所得,但在溶液中IgG抗体的浓度都相同的情况下,两管中抗原抗体比例相差很大,所以检测结果也有偏差是可以理解的。同时再结合散点图拟合出的标准曲线,可以发现,浓度较高的两管标准液距离拟合曲线的偏差是最大的,由此推断,1:1原液和1:2原液并不适合本次实验中所给的羊抗人抗体浓度(未知)。所以,误差来源除了以上所说原因之外,还有本次实验提供的抗体浓度,并不适合原液中IgG浓度的检测,而稀释三倍后的样品属比较适合的范围。所以最大的误差来源是抗体浓度的选择,虽然抗体浓度是保证过量的,但是过量的程度相对每个管来说是不同的,1:1和1:2也许需要更大的浓度。
六、思考
1本实验采用的免疫比浊法适用于人体内哪几种Ig?人体血清中含有五类免疫球蛋白,分别为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。其中前三种含量相对较高,而IgD和IgE含量极低,膜结合型IgD构成BCR,是Bcell成熟的标志,IgE在正常人血清中含量最少,与Ⅰ型超敏反应和寄生虫感染有关。理论上此五种Ig均可以采用免疫比浊法检测含量,但临床上常只检测前三种含量较高、疾病相关性更强的Ig,在考虑寄生虫感染和变态反应性疾病时还可以检测血清中IgE的含量。2检测血清等体液标本中某种抗原分子的方法?原理同本实验,采用抗原抗体结合的原理,凝集反应、沉淀反应、中和反应,以及免疫荧光法和酶联免疫吸附试验等,在使用抗原抗体结合原理时,将抗体加入荧光可以直接检测荧光强度来定量检测抗原含量,而酶联免疫吸附试验还可采用双抗体法以级联放大更易检
f测。3使用免疫比浊法时,抗原抗体的比例应采用哪个区域?应采用抗体过量的前带,因为所检测的物质是抗原,希望所加样品中的抗原完全与抗体结合形成微粒,所有的微粒均可吸收酶标仪中透过的光线。因为吸光r