第十四章色谱法分离原理
一.
教学内容
1色谱分离的基本原理和基本概念2色谱分离的理论基础3色谱定性和定量分析的方法
二.
重点与难点
1塔板理论,包括流出曲线方程、理论塔板数
及有效理论塔板数
eff和塔板高度H及有效塔板高度Heff的计算2速率理论方程3分离度和基本分离方程
三.教学要求
1熟练掌握色谱分离方法的原理2掌握色谱流出曲线(色谱峰)所代表的各种技术参数的准确含义3能够利用塔板理论和速率理论方程判断影响色谱分离各种实验因素4学会各种定性和定量的分析方法
四.学时安排4学时
第一节概述
色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。他在研究植物叶的色素成分时,将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入石油醚使其自由流下,结果色素
1
f中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义但仍被人们沿用至今。
在色谱法中,将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相(固体或液体)称为固定相;自上而下运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相;装有固定相的管子(玻璃管或不锈钢管)称为色谱柱。当流动相中样品混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用,由于各组分在性质和结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强弱也有差异,因此在同一推动力的作用下,不同组分在固定相滞留时间长短不同,从而按先后不同的次序从固定相中流出。
从不同角度,可将色谱法分类如下:1按两相状态分类
气体为流动相的色谱称为气相色谱(GC)根据固定相是固体吸附剂还是固定液(附着在惰性载体上的一薄层有机化合物液体),又可分为气固色谱(GSC)和气液色谱(GLC)。液体为流动相的色谱称液相色谱(LC)同理液相色谱亦可分为液固色谱(LSC)和液液色谱(LLC)。超临界流体为流动相的色谱为超临界流体色谱(SFC)。随着色谱工作的发展,通过化学反应将固定液键合到载体表面,这种化学键合固定r