,预热5分钟。413双击电脑桌面的ABIPrism5700SDSSoftware图标进入程序设置界面。414单击“文件”菜单中的“新建”命令,(或单击工具栏中的“新建”按扭)在测定、。容器和模板中做相应的选择,点击OK。415应用检测管理程序,并将其添加到样品板文档中。416检测反应管,417根据当次实验所需条件编辑时间和温度。运行样品板文档。42结果分析标准程序:应按以下步骤进行:全部曲线阴性对照阳性对照阳性室内质控品阳性标准品逐个分析(标出阳性标本和可疑标本)调整参数,获得较好的标准曲线,显示定量结果登记,发报告。421整体曲线的观察:将所有曲线选中进行整体观察1)观察是否存在污染情况(包括标本污染和试剂污染),特别应注意大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。2)观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。422阴性对照的分析阴性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。作用:用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。423阳性对照的分析阳性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。作用:用以监测实验能否正常检出阳性标本,避免假阴性的出现。
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fABCD人民医院检验科
主题内容
424室内质控品的分析
PCR室作业指导书
基因扩增检测及结果分析
文件编号:ABCD3PR09版本修订号:A0生效日期:20060808
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室内质控品:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知浓度室内质控品。作用:用以监控日常实验的精密度。425阳性标准品的分析1)各梯度曲线的分布是否均匀,若各梯度曲线均未分开,则表明阳模稀释可能存在问题,提示实验中存在较大人为误差。2)观察各曲线的Ct值是否在平日的正常位置。情况1:若出现低拷贝标准品做不出,而各曲线Ct值均后移,则判断是否为试剂扩增效率下降(如试剂过期或保存条件不合格)。情况2:出现低拷贝标准品做不出,而高拷贝曲线Ct值均正常,则提示可能存在低拷贝阳性标准品的降解情况。3)每日必做10标准品,用作以下三方面监控:一是否存在操作误差,如加样量过少等原因导致10标准品未能检出;二是否存在稀释后的梯度放置过久,低拷贝标准品降解的情况;三是若高拷贝标准品出现Ct值后移,且能排除情况1、2,则判断是否为试剂灵敏度下降。426单个曲线的判断:逐个分析每条曲线,判断曲线的阴阳性或属可疑曲线。(可疑标本是指曲线在25个Ct值后出现上涨且平台趋势不明显或r