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MDPACIFIC淋巴细胞分离液说明书主要用途:淋巴细胞分离试剂是一种旨在通过葡聚糖和泛影酸钠混合液,达到特定比重,然后离心分层以获得纯化完整的单核细胞淋巴细胞的权威而经典的技术方法。可以被用于动物(大鼠、小鼠等)单核细胞淋巴细胞的分离、鉴定、染色、标记、培养、DNA萃取、线粒体分离、细胞因子测定和细胞流式仪分析等研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,分离出色,性能稳定,细胞活性保证。技术背景:全血溶液含有血清、各种蛋白因子、无核血红细胞、血小板、多核白细胞和单核白细胞等。为了获得纯化完整的单核白细胞淋巴细胞,采用Boyum(1968)的离心技术,可以方便快速地从全血和骨髓中分离。产品内容:淋巴细胞分离液(200)毫升产品说明书1份产品特点:密度变化率依照Ficoll400泛影酸和氢氧化钠。最佳分离溶液的密度为参照具体产品的标签生理学参数在低粘度时高密度无菌即用型溶液产品规格
f检测标准:热源检测结果:<05EUml无菌检测结果:已检测应用人外周血中分离出淋巴细胞的最佳试剂。这种分离液同样可被用作从其它途径分离人的淋巴细胞,包括骨髓血细胞、脐带血细胞及组织匀浆。实验步骤实验开始前,室温预热淋巴细胞分离液。然后进行下列操作。(注:上述方法适用于从外周血中分离淋巴细胞。如从骨髓、脐带及组织匀浆中分离,需要先去除红细胞后再进行上述步骤分离淋巴细胞。1.准备无菌的锥形离心管2.加入淋巴细胞分离液3用ha
k’s液或用户自备的PBS缓冲液1:1比例(如果全血样本粘稠,可适当增大比例)稀释抗凝过的全血样品。3.小心沿着管壁,接近分离液层面,非常缓慢地加入新鲜的稀释过的全血样品在淋巴分离液上面。(注意:切记不要搅浑淋巴细胞分离液)4.小心放进台式离心机离心30分钟,速度为400g5.小心取出离心管,切记不要震动6.可见,最上层为淡红色透明血浆,其次为薄薄的致密白色环
f状层,然后为离心液层,最后为红色沉淀在管底的红细胞层。7.小心抽掉白色环状层以上三分之二血浆液,切记不要搅动白色环状层8.用无菌塑料吸管小心吸取白色环状层液体9.移入到新的无菌的锥形离心管10.加入用户自备的PBS缓冲溶液11.轻柔上下倾倒混匀12.放进台式离心机离心10分钟13.小心倒掉上清液14.用手指轻弹离心管至下,使白细胞颗粒群松动15.(选择步骤)加入毫升用户自备的淋巴细胞完全培养液,进行细胞培养16.(选择步骤)或加入毫升用户自备的白细胞冻存液,放进r
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