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是一种应用高分辨率的荧光数码影像系统,旨在获得被筛样品对细胞产生的多维立体和实时快速的生物效应信息在细胞水平上检测多个指标的多元化、功能性筛选技术平台。HCS的优势高内涵筛选的筛选结果是多样化的它以多指标多靶点共同作用为主要特点涉及的靶点包括胞内成分、细胞的膜受体、细胞器等。从筛选载体上看,高内涵药物筛选与高通量药物筛选并没有显著的区别,也在微孔板上进行。其优点是它的检测体积并未因检测指标增加而增高,操作步骤同样简单可行、自动化。更重要的是获取信息是以细胞为单位,而不像是以微板孔为单位,这就意味着研究者可以从细胞群体中的各种反应获取信息,而不是像以前那样信息仅仅来源于一个微板孔中的所有细胞的平均反应。也就是说,研究者得以用更少的时间和花费进行更多的实验,获取更多研究信息和统计相关数据。基于细胞的小分子库高内涵筛选已用于识别新的有治疗作用的先导化合物,目前已对十
f万余个化合物展开了基于图像的筛选。目前高内涵药物筛选主要在影响细胞功能方面应用,例如细胞毒性、G蛋白偶联受体调节剂、转录因子的活化、活性物质释放等。可调节的扫描模板可用于腔室玻片、多孔板以及组织芯片扫描。多重扫描任务可应用于单个腔室或多孔,对个体实验设计提供最大的自由度。获取的数据立刻传输到本地服务器以便进行有效分析和存储,独立于平台的开放式显微镜环境OME接口自动创建链接到现有的图像分析解决方案总而言之,HCS为单个实验提供高度的灵活性和真实的图像,并确保高通量研究所需的自由度,应用广泛且灵活性强。Imagi
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g荧光标记技术指利用一些能发射荧光的物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。2FRET荧光共振能量转移当一个荧光分子(又称为供体分子)的荧光光谱与另一个荧光分子(又称为受体分子)的激发光谱相重叠时,供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光,同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。FRET程度与供、受体分子的空间距离紧密相关,一般为7~10
m时即可发生FRET随着距离延长,FRET呈显著减弱。供体和受体之间FRET的效率,可以由E11RR0exp6反映,其中R表示供体和受体之间的距离,R0表示福氏半径,依赖供体发射谱和受体激发谱的重叠程度,以及供体和受体能量转移的偶极子的相对方位。发生原理荧光共振能量转移是指在两个不同的荧光基团中,如果一个荧光基团(供r
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