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第四部分浅尝现代生物技术实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离
一、乳酸脱氢酶
1．简称：____
2．作用：在____________存在下，乳酸脱氢酶能使______产生________，具体反应式
见下：
________________________________________________________________________。
答案：1LDH
2．氧化型辅酶NAD＋乳酸丙酮酸CH3－CHOH－COOH＋NAD＋LDHCH3－CO－COOH＋NADH＋H＋
乳酸
丙酮酸
二、同工酶1．概念：指能____________，但其________________的一组酶。2．实例：LDH有____种同工酶。3．LDH同工酶：结构特点：由____种亚基____和____以不同比例组成的________。具体类型：______、______、______、______和M4。存在特点：在动物的________________中，LDH各种同工酶的______不同。答案：1催化同一化学反应酶蛋白的分子组成不同2．53．2LM四聚体H4H3MH2M2HM3细胞分化及胚胎发育过程比例
三、乳酸脱氢酶同工酶的分离实验1．实验方法：____________法。2．染色：1方法：________法2染色原理：在LDH的作用下，NAD＋被还原为NADH，NADH将______和______传递给甲硫吩嗪PMS，还原的甲硫吩嗪再将______和______传递给氯化氮蓝四唑NBT，还原的氮蓝四唑呈____色，展现在电泳凝胶上。3．实验材料：牛的______，其余略。
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f4．实验步骤：制备________↓加样↓________↓________
答案：1聚丙烯酰胺电泳2．1活性染色2电子H＋电子H＋蓝3．血清4．电泳凝胶板电泳染色
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