价连接法设计的荧光探针。它分别以有优良光学性质的蒽作为荧光基团，以对Z
2有特异性识别的基团双2吡啶甲基氨DPA为识别基团，通过亚甲基将识别基团和荧光报告基团连接在一起。通过对比加锌前后荧光强度的不同实现了对锌离子的检测。2置换型荧光探针
f图14置换型荧光探针
利用该方法设计的荧光探针是通过识别基团分别与荧光指示剂和被分析物结合能力的强弱来实现对被分析物的检测。该类传感器对识别基团和荧光指示剂的要求都比较高，既要选择能和识别基团结合但结合能力又不是特别强的荧光指示剂，又要设计对被分析物能特异识别的识别基团。该类设计方法多用于阴离子传感器的设计。
2002年，Kim小组23设计了邻苯二酚紫作为荧光指示剂，双锌配合物为HPO42识别基团，并将二者自组装成化合物2，用于中性条件下水溶液中HPO42的检测。加入识别客体HPO42后，由于HPO42与双锌配位能力强于邻苯二酚紫，从而把邻苯二酚紫挤开，使之进入溶液，表现为其原来颜色。在识别过程中，溶液颜色从蓝色变为黄色，常见的Ac、CO32、NO3、N3、ClO4、S2、F、Cl、Br都不影响HPO42的检测，表现出较好的选择性。
图15置换型HPO42化学传感器
3化学计量型荧光探针（chemodosimeter）
f化学计量型荧光探针分子是利用探针分子与识别客体之间特异不可逆的化学反应前后产生荧光信号的不同而对分析对象进行检测的一类探针24。主要包括两种类型：一类是目标离子和探针分子发生化学反应后仍旧通过共价键相连接另一类是目标离子催化了一个化学反应（图16）。
图16化学计量法的两种类型
一般而言，化学计量型荧光探针分子都具有专一性和不可逆性。尽管这类探针已有不少报道但由于设计较为困难和反应不够灵敏等缺陷而进展较为缓慢。
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4
图17氨基酸荧光分子探针
fKim和Ho
g等25设计的识别半胱氨酸及高半胱氨酸的荧光分子探针3，属于第一种类型。他们利用半胱氨酸及高半胱氨酸与醛生成五元噻唑环或六元噻嗪环的特异反应以及反应前后化合物3和4荧光性质的显著差异实现了对半胱氨酸及高半胱氨酸的高选择性检测。
化合物526是较早应用化学反应原理实现检测客体的荧光探针，属于第二种类型。化合物5的乙腈溶液中加入汞离子后荧光显著增强34倍并红移，进一步用质谱检测发现生成了脱硫产物6。
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图18基于汞脱硫原理的汞离子荧光探针
112荧光分子探针的响应机理
目前，荧光分子探针的响应机理主要有以下几种：光致电子转移（PETphotoi
ducedelectro
tra
sfer）、分r