B.人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定C.大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活D.人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感E.大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化10.鸟枪法克隆目的基因的战略适用于(A.原核细菌C.丝状真菌A)
B.酵母菌D.植物E.人类
11.cDNA第一链合成所需的引物是(D)A.PolyAC.PolyG12.cDNA法获得目的基因的优点是(A.成功率高C.操作简便13.人工合成DNA的单元操作包括(I去保护II偶联B.PolyCD.PolyTB)B.不含内含子D.表达产物可以分泌E)E.能纠正密码子的偏爱性E.发夹结构
III封端IV氧化B.IIIV
A.III
C.IIIIIID.IIIIIIVE.IIIIIIIV14.为了减轻工程菌的代谢负荷,提高外源基因的表达水平,可以采取的措施有(A、C)A.将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。B.在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。C.当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。D.当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制15.菌体生长所需能量(A)菌体有氧代谢所能提供的能量时,菌体往往会产生代谢副产物乙酸。A.大于C.小于三、问答题(共计50分)1.基因工程菌的遗传不稳定性的两种主要表现形式是什么?基因工程菌的遗传不稳定性的主要机制是什么?B.等于
f(10分)基因工程菌的遗传不稳定性主要表现在重组质粒的不稳定性,这种不稳定性具有下列两种表现形式:1.结构不稳定性:重组DNA分子上某一区域发生缺失、重排、修饰,导致其表观生物学功能的丧失2.分配不稳定性:整个重组DNA分子从受体细胞中逃逸。基因工程菌的遗传不稳定性的的产生机制1.受体细胞中的限制修饰系统对外源重组DNA分子的降解2.外源基因的高效表达严重干扰受体细胞正常的生长代谢3.重组质粒在受体细胞分裂时的不均匀分配,这是重组质粒逃逸的基本原因4.受体细胞中内源性的转座元件促进重组分子的缺失重排2.在人胰岛素AB链分别表达法中,为何将AB链编码序列与b半乳糖苷酶基因融合?(10分)小分子蛋白在大肠杆菌中表达后不稳定,容易被细胞内蛋白酶降解失活。表达融合蛋白的优点是基因操作简便;在菌体内比较稳定,不易被细菌酶类所降解,容易实现高效表达。人胰岛素AB链分别表达法中,将A、B链编码序列与b半乳糖苷酶基因融合,分别表达出融合蛋白,使表达的蛋白分子量足够大,避免被蛋白水解酶分解,提高其稳定性及表达率。3.动r