实验四细菌的划线分离与培养
一、实验前要说明的几点问题
点名查看学生出勤情况。总结上次作业，提出作业中出现的问题并讲解。
二、板书部分
（一）目的要求
1掌握需氧菌分离培养的基本要领。
2了解厌氧菌的分离培养原则及方法。
（二）实验容
1用普通琼脂平板做一次划线分离培养。
2用普通肉汤做一管大肠杆菌的移植培养。
3用普通琼脂斜面做一管金黄葡萄球菌的移植培养。
4用划线法进行真菌的分离培养（示教）
（三）作业
1为什么要进行细菌的分离培养？
2进行分离培养应注意哪些事项？
3细菌分离培养的方法有哪些？（重点叙述平板划线法）
4叙述真菌的划线分离方法。
三、实验容
主要容有分离培养及目的、注意事项、分离培养的方法、真菌的培养方法、
患病动物病料中分离培养、钓菌、移植。
1什么是分离培养及目的：分离培养是细菌学检验的基本技术之一。分离培
养之目的，在于从被检材料中由多种细菌里分离出一种细菌。
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2注意事项：1）分离培养前应考虑所分离的细菌的特性，选择适合其生长需要的培养基（需氧还是厌氧、营养的要求高还是不高、培养温度等）等。例如：链球菌在普通琼脂不长，要加血清或血液。大肠杆菌和葡萄球菌要求较低，普通的培养基即可生长。2）防止污染。分离培养的整个过程要严格无菌操作。培养基和一切用具必须彻底灭菌；操作时必须靠近火焰；操作完毕后，禁止再让培养基接触外界空气。3）防止接种器械过热，很容易杀死分离培养的细菌，如接种环在烧灼灭菌后，不能立即钓取细菌材料，应在酒精灯旁凉凉；另外还应注意防止已钓取菌料的接种环，不慎通过火焰而将细菌杀死。4）初代分离时发现有多种细菌，观察找到目的菌落，再拿一肉汤培养基纯化培养。然后在接种实验动物，作成凝集抗原，做血清学鉴定，。还可以反过来做抹片染色观察。3分离培养的方法：主要分需氧菌的分离培养方法、厌氧菌的分离培养方法和需要CO菌的培养分离方法。1）需氧菌的分离培养法（1）平板划线法：划线后有单个菌落，便于观察菌落的形态、溶血性等。方法左手拿琼脂平板，使其与水平面成45。角；右手拿铂金耳，使之与水平面平行，靠近酒精灯火焰操作。将接种环于酒精灯火焰中灼烧灭菌，待其冷却后，蘸取欲检材料少许，注意不要划破琼脂，不要划得太疏，以免造成浪费，不要重复划线，以免形成菌苔。划线方法：方格划线、蛇形划线、区域划线、交叉划线，
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选择其中一种进行划r