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免疫学检测
抗原抗体反应a
tige
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tibodyreactio
是指抗原与相应抗体所发生的特异性结合反应。抗原抗体反应的特点(一)特异性抗原抗体的结合本质是抗原决定簇与抗体超变区的结合。抗原决定簇与抗体超变区在一级结构和空间构型上呈互补关系,所以它们的结合具有高度特异性。抗原抗体结合力的大小,常用亲和力(affi
ity)或亲合力(avidity)来表示,前者指抗体分子上一个抗原结合部位与相应的抗原决定基之间的结合强度,后者指一个抗体分子与整个抗原之间的结合强度。抗原与抗体的结合为非共价的可逆结合,它们空间构象的互补程度不同,结合力强弱也不同,互补程度越高,亲和力越高。(二)可逆性抗原抗体结合反应不是化学反应,而是非共价键的结合。4
种分子间引力参与了抗原抗体间的结合,分别是静电引力、范德华力、氢键结合力和疏水作用。抗体和抗原之间的亲和力源自抗体超变区和抗原决定簇在空间构型上的互补性。抗原和抗体分子均是极性分子,反应温度、酸碱度和离子浓度对它们的极性有重要影响,从而影响着两者的空间构型和亲和力。抗原抗体结合反应是可逆反应。正向反应产物是抗原抗体复合物,复合物解离则是逆向反应。(三)抗原和抗体的浓度及合适比例抗原和抗体的浓度及合适比例是可见现象能否出现的关键。当比例不合适时,少量的小分子抗原抗体复合物停留在反应的第一阶段,不能进一步交联和聚集,故不出现肉眼可见的现象。一般用电解质溶液来调整抗原和抗体的浓度,使两者的比例合适。(四)抗原抗体反应的阶段性抗原抗体反应的过程可分为两个阶段。第一阶段是抗原抗体发生特异性结合,此阶段的抗原抗体复合物量很少,分子小,肉眼看不见。当抗原抗体比例合适并且具备一定的环境因素如电解质、pH、温度、补体时,抗原抗体复合物进一步交联和聚集,反应也进入第二阶段,即可见反应阶段。第二阶段的抗原抗体复合物可以出现凝集、沉淀等肉眼可见的现象,还可激活补体,引发溶菌、溶血
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等现象。影响抗原抗体反应的主要因素(1)电解质抗原与抗体发生特异性结合后,若没有电解质参加,也不出现可见反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成,体外抗原抗体反应一般在生理盐水或缓冲液中进行。(2)酸碱度抗原或抗体都是具有一定等电点的极性物质,pH过高或过低都将影响它们的理化性质。因此,抗原抗体反应一般在pH为6~8环境中进行。当pH接近颗粒性抗原的等电点时,即使无相应抗体存在,颗粒性抗原也会发生非特异性凝r
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