洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套或用75乙醇等消毒剂再次擦拭双手，方可进入无菌室进行操作。27无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，灭菌后通无菌风至少30mi
以上人员才能进入。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。28供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。29每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。210吸取菌液时，必须用移液器吸取，切勿直接用口接触吸管。211接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。
f212带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5来苏尔溶液或巴氏消毒液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。
213如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。
214凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。
215无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下，取内径90mm的无菌营养琼脂平板5个，分别放置无菌室四周及中央位置，开盖暴露30分钟后，倒置于36℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落平皿，10000级洁净室平均不得超过3个菌落平皿。如超过限度，应用臭氧发生器等对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。
3压力蒸汽灭菌器的安全使用操作程序：31堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，各包之间留有空隙，依次堆放在灭菌桶的筛板上，以蒸汽穿透，提高灭菌效果。需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否达到要求。32加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管2厘米以上（不宜过多）；连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。33密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高压灭菌锅。把堆放好物品的灭菌桶放在锅体内，盖上锅盖并锁紧。34加热灭菌：将灭菌器接通与铭牌一致的电源，按下电源开关，接通电源，指示灯亮，表示电源已正常输入本器，按下开始按纽电热管开始加热工作；非全自动的高压灭菌锅要注意排空空气，确保灭菌时高压锅内是饱和水蒸气，高压灭菌锅内灭菌期间工作人员需监视高压锅指r