食品中金黄色葡萄球菌的检验（试验计划用）一实验目的要求1了解食品的质量与金黄色葡萄球菌检验的意义。2掌握金黄色葡萄球菌的生物学特性。3掌握金黄色葡萄球菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。4掌握食品中金黄色葡萄球菌检验的方法和技术。二原理1葡萄球菌在自然界分布极广，空气、土壤、水、饲料、食品（剩饭、糕点、牛奶、肉品等）以及人和动物的体表粘膜等处均有存在，大部分是不致病，也有一些致病的球菌。金黄色葡萄球菌是葡萄球菌属一个种。可引起皮肤组织炎症，还能产生肠毒素。如果在食品中大量生长繁殖，产生毒素，人误食了含有毒素的食品，就会发生食物中毒，故食品中存在金黄色葡萄球菌对人的健康是一种潜在危险，检查食品中金黄色葡萄球菌及数量具有实际意义。2金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆凝固。多数致病菌株能产生溶血毒素，使血琼脂平板菌落周围出现溶血环，在试管中出现溶血反应。这些是鉴定致病性金黄色葡萄球菌的重要指标。三实验内容（一）基本流程样品处理→→选择性增菌→→选择性平板分离→→血浆凝固酶试验鉴别→→结果报告（二）样品处理1固体或半固体食品：以无菌操作称取样品奶粉1g，往检验瓶中加入90ml蒸馏水，摇匀，制成110样品匀液。2液体食品：吸取25ml样品，放入装有225ml灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠），经充分振摇制成110样品匀液。（三）选择性增菌1吸取50ml上述稀释液，加入50ml75NaCl肉汤培养基中。混匀。置37℃温箱中培养24小时。2培养结果：金黄色葡萄球菌在75NaCl肉汤中呈混浊生长。（四）选择性平板分离1取上述增菌液1接菌环，划线接种于契伯曼平板上。置37℃温箱中培养24小时。
f2培养结果：金黄色葡萄球菌在契伯曼平板上所生成的菌落较小。因为可分解甘露醇并产酸，使菌落周围呈黄色（酚红指示剂，酸黄碱红）。（五）血浆凝固酶鉴别及革兰氏染色观察1血浆凝固酶鉴别试验。取干净玻片一块，用蜡笔将玻片划成两格。其中一格加生理盐水2接种环，另一格加12的兔血浆1接种环。用接种环在契伯曼平板上取可疑金黄色葡萄球菌菌落少许，先在生理盐水中磨匀，使呈混悬液。然后取此混悬液1接菌环于12的兔血浆中混匀。分钟以内若有大片凝块35出现即为阳性，无凝块出现即为阴性。2革兰氏染色观察。取干净载玻片一块，用接种环加灭菌生理盐水2环。在契伯曼平板上取可疑金黄色葡萄球菌菌落少许与之混匀，过火干r