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或瑞氏染色良好。以狄奈氏Diereesa
dWeiborger染色法染色,可见清晰的蓝色菌落、不褪色.而其他细菌的菌落在30mi
后褪色,可作为鉴别方法之一。其能够合成自身大分子,但其基因组小病毒支原体立克次氏体E.coli,携带信息量不多,而且GC含量多低于30m01%,生物合成能力有限。整个细胞由DNA1070kb、核糖体和细胞膜3种细胞器组成,这是执行自体繁殖和合成大分子所必需的最低限度的细胞器种类;缺少细胞壁,没有固定的形态,在琼脂培养基上一般不呈现为支原体特有的“煎蛋状”菌落;细胞膜在电镜下呈现为暗一亮一暗3层,其中,蛋白质约占2/3,脂类约占1/3。体表的膜蛋白、脂多糖是主要抗原。1.3培养特性该菌兼性厌氧,生长需求极为苛刻,在一般的培养基中很难生长,是动物支原体中较难培养的一种.而且生长缓慢.常因猪鼻支原体的过度生长而被掩盖。在A26液体培养基,保持一定湿度,37℃培养2~10d,可长成直径25~100斗m的菌落,但不呈“煎荷包蛋状”。可在67日龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖.也能适应家兔在细胞培养基上生长。菌落大小与培养基的质量及接种密度有直接关系。若
f培养基质量差,接种密度又高,则菌落细小扁平,表面呈花瓣状。用液体培养基分离时,培养基是在细胞培养平衡盐类缓冲液中加入乳清蛋白水解物、酵母浸液和猪血清,在37℃、含5%~7%CO:条件下培养,首先可观察到pH值改变,培养25d,pH值从7.6降至6.8,培养时间越长,pH值下降越多.这是观察有无支原体生长的一种重要而又简便的方法¨引。细心观察也可见到培养液有轻微的混浊,稍加振荡还可见到有少量沉淀。也可用牛心消化汤加乳清蛋白水解物培养基或者Friis兔肉汤培养基进行培养。肉汤中菌体的形态.通过涂片、甲醇固定、姬姆萨染色,其形态为极小的球状颗粒,几个集聚成明,直径0.4“m。培养物涂片一千燥后观察.主要可见呈两极状、环状等,直径0.50.75“m,培养物中也有一些大的结构,其作用不明,在一些新的分离物中多见。固体培养时,可将适应液体培养基生长的培养物接种于琼脂培养基表面,培养条件需体积分数为5%。10%CO:和潮湿空气,在经适当稀释后接种2~3d可见到单个存在的针尖或露珠样菌落,710d菌落直径约4mm.传代后生长不良。在血琼脂上初代生长良好,在马丁琼脂培养基上生长不良D4。该菌可在猪肺单层细胞上生长、繁殖。并对细胞有致病作用,也能在鸡胚卵黄囊中生长。1.4致病性与理化特性Mhp的天然宿主仪限于猪,人工接种可r
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