与单波长法不同双波长法具有排除来自样品内部干扰和降低吸收池误差的优点。正是因为双波长法有着单波长法无可比拟的优点在许多临床生化检验试剂盒中都同时给出了单波长法和双波长法两种检验参考波长。4两点法也称固定时间法，其主要针对某些代谢物（而不是酶）的测定，包括有工具酶参与的动力学反应，以及少数具有典型动力学特征的化学反应。其测定方式是监测比色池内反应溶液在前后两次时间间隔内的吸光度变化值。在测量时间内不需要作线性监测，也不需要计算每分钟吸光度变化率。这种方法的优点是可以消除样品、试剂的颜色、浊度以及一些干扰物质对测定的干扰。在样品与试剂混合后，延迟一定的时间读取As1（某一时刻的吸光度值），隔一定时间后读
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f江苏大学硕士学位毕业论文取As2（另一时刻的吸光度值），计算：AsAs2As1，然后与标准样品比较，求得待测物的浓度，即：
CsAs2As1F
（27）
式中，As1—待测样品的第一点吸光度；As2—待测样品的第二点吸光度；F—常数，由用户所选择的试剂给出（因素值）或由仪器测量标准样品得到：
F
CSTDASTD2ASTD1
（28）
式中，ASTD1—标准样品的第一点吸光度；ASTD2—标准样品的第二点吸光度。
224工作曲线与工作方程
工作曲线是反应吸光度随生化项目浓度变化关系的曲线19。工作方程是工作工作曲线反映的生化项目浓度与反应吸光度的函数关系式。一般认为，工作方程是线性函数AkCB，一个典型的工作曲线如图22所示。其中B是空白吸光度，对应浓度为0（蒸馏水）时，加入试剂后的吸光度。对曲线上的任一点，曲线的横坐标对应浓度为C1，纵坐标对应反应吸光度A1。
反应吸光度
A1
B
AkCB
0
C1
浓度
图22工作曲线图
225生化校准
生化校准是通过测试已知浓度的标准物来确定工作曲线的过程。按照校准的方法可以分成两点线性法、多点线性法、一点线性法。与生化测试过程中的错误值影响一次测试不同，校准过程中的错误将通过工作曲线参数的形势记忆下来，从而影响以后所有生化测试的结果，直到下一次校
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f江苏大学硕士学位毕业论文准才终止。所以，校准过程的正确性尤其重要。为了尽可能避免记忆错误的校准结果，每次校准都进行两次重复实验，只有完全合格的数据才被接受。
23半自动化生化分析仪的结构
生化分析仪主要用来对人的血液和其他体液中的各种生化指标进行分析。首先需要医务人员进行样品的采集、识别、处理和存储。从测试对象处采取血液等分r