异,P001即认为有差异显著性,所有结果均以平均值和标准差来表示。
2结果与分析
免疫组织化学结果的判定参照标准(阳性细胞判定标准):经免疫组织化学染色的切片,背景无色或浅蓝色。Fas和FasL的免疫阳性产物为棕黄色颗粒或团块,表达于固始鸡免疫器官淋巴细胞细胞膜和细胞质,致使整个阳性细胞呈棕黄色,阳性细胞界限明显。由于免疫阳性产物不表达于细胞核,故细胞核呈蓝黑色。表达阴性的淋巴细胞由于用苏木精复染而使细胞核呈蓝色,细胞质和细胞膜不着色。免疫组织化学结果的量化标准:应用Leica显微图像处理系统,QWi
软件,确定视野中单位面积(8815249m2)内阳性细胞的多少,作为凋亡基因表达的量化指标。具体操作为:应用Leica显微处理系统,在10倍(目镜)×20倍(物镜)即×200显微镜下采集图像,QWi
软件计数每个视野电脑显示屏显示框内阳性细胞的个数(该显示框显示实际切片视野面积为8815249m2)。例如:每一试验组5羽,每羽每个免疫器官随机选择1张切片,每张切片随机选择3个互不重叠的有阳性细胞的视野,计算每个免疫器官5张切片共15个视野内阳性细胞的平均值,即该免疫器官视野中单位面积(8815249m2)内阳性细胞的个数,以此作为该试验组凋亡基因表达的量化标准。21Fas在固始鸡免疫器官内的表达结果211Fas在固始鸡法氏囊内的表达结果(三级标题,五号楷体,正文不空行,但空一格)Fas蛋白表达于固始鸡法氏囊内不同部位的淋巴细胞,不表达于上皮细胞(见图版1,2)。阳性细胞分布于上皮层与淋巴小结之间靠近上皮层的固有膜区域、淋巴小结边缘、淋巴小结与淋巴小结之间固有膜区域,淋巴小结内部少量淋巴细胞也有Fas表达。阳性细胞呈簇团状分布,也呈散在分布(见图版1,2)。Fas在不同发育阶段固始鸡法氏囊内均有表达,但表达量有所差异(表1)(表用三线表格,表格中内容不要跨页)。由表1可知,1w固始鸡法氏囊内Fas表达量较低,4w表达量最高,以后则逐渐下降,并呈波浪样动态变化。212Fas在固始鸡脾脏内的表达结果Fas蛋白表达于固始鸡脾脏内不同部位的淋巴细胞(见图版3~5)。Fas阳性细胞主要分布于固始鸡脾脏内红髓、边缘区、淋巴小结的周围和动脉周围淋巴鞘的周围。动脉周围淋巴鞘淋巴细胞极少有Fas表达,淋巴小结内部和边缘的淋巴细胞无Fas表达。阳性细胞呈散在分布(见图版3~5)。由表1可知,Fas在不同发育阶段固始鸡脾脏内均有表达,但表达量有所不同。其中1w固始鸡脾脏内Fas表达量较低,其它r