免疫组化检测CD34的表达
1基本原理免疫组化，是应用免疫学基本原理抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，
通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术immu
ohistochemistry或免疫细胞化学技术immu
ocytochemistry。
威斯腾生物4006756758
（1）1×PBS（pH74，25L200157g137mMNaCl0499552g268mMKCl050013075g147mMKH2PO47253337g81mMNa2HPO4），115℃×15mi
；
（2）085NaCl500ml425gNacl500ml三蒸水，115℃×15mi
；
（3）4多聚甲醛500ml20g多聚甲醛500mlPBS在65℃水箱中3h多，再放入4℃保存。
（4）DNaseIbuffer：40mMTrisHCl（pH79）10mMNaCl6mMMgCl210mMCaCl2；
（5）Protei
aseKbuffer：100mMTrisHCl（pH80）50mMEDTA；
（6）DNase1（原液1000Uml按1：99DNase1缓冲液稀释至10Uml）；
（7）DAB工作液（临用前配制，5ul20×DAB1ul30H2O294ulPBS）
（8）20μgmlProtei
aseK工作液（按1：500稀释贮存液1mgml）。
（9）另外，双蒸水、无菌085NaCl、二甲苯、梯度乙醇（100、95、85、70、50）、
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f苏木素。
2主要仪器设备
电热压力蒸汽消毒器XDD
浙江绍兴医疗器械总厂
超净工作台
苏州净化设备公司
TC2323型CO2恒温孵箱
美国SHELLAB公司
恒温烤箱
上海跃进医疗器械厂
高速台式离心机BACKMANCS15R
美国Beckma
公司
抽滤器AUTOSCIENCEAP01
上海
磁力搅拌器791
江苏江阴科研器械厂
022um纤维素滤膜
德国BM公司
045um混合纤维素滤膜
德国BM公司
110000电子天枰SartoriusAC211
德国
细胞培养瓶及细胞培养板Costar
美国
细胞计数板
上海医用仪器厂
光学显微镜OLYMPUSCK40
日本
倒置显微镜（OLYMPUS
日本
照像系统OLYMPUSBH2
日本
切片机：
德国Leica
展片机：
德国Leica，HI1210型
烤片机：3实验方法
德国Leica，HI1220型
31载玻片的处理：
抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。
1APES：现用现配。将洗净的玻片放入以150比例丙酮稀释的APES中，停留2030秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES，置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位，并尽量减少气泡的存在，以免影响染色结果。
2HistogripTM：将洗净的玻片放入以150比例丙酮稀释的Histogrip液中，停留12分钟，然后用双蒸水快速清洗三次，室温干燥或60oC烤箱烘烤一小时，装盒备用。
3PolyLLysi
e：将洗净、干燥的载玻片放入以110比r