应体系与反应条件标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液4种dNTP混合物引物模板DNATaqDNA聚合酶Mg2加双或三蒸水至10ul各200umolL各10～100pmol01～2ug25u15mmolL100ul
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：①引物长度：1530bp，常用为20bp左右。②引物扩增跨度：以200500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基：GC含量以4060为宜，GC太少扩增效果不佳，GC过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3