。
12除含有较低分子量外，一个理想质粒载体必需包含______、__________、_______三个部分。
13．转基因植物操作中常见载体是
。
14pcDNA31用于
。
三、名词解释（每小题4分，共20分）
1．目标基因：
2．基因工程：
3．载体：
4．Wester
印迹：
5．核酸分子杂交：
四、简答题（每小题10分，共20分）1基因工程基础操作程序
2怎样制备目标基因
f《基因工程》评分标准和参考答案一、选择题：每小题15分，共15分；多选不得分。
1d2b3a4b5b6c7c8c9a10c二、填空题每空1分，共25分1．II类酶。2．碱性磷酸酶；5’端磷酸基团3．DNA聚合酶I。4．质粒DNA；病毒DNA；质粒和病毒DNA杂合体5．没有适宜限制性内切核酸酶识别位点；选择标识6．质粒和噬菌体7．合成探针；合成cDNA；用于PCR反应；进行序列分析8．印迹对象不一样：Norther
是RNA，Souther
是DNA；电泳条件不一样，前者是变性条件，后者是非变性电泳9．TagDNA聚合酶10．0C；42C11．染色体变性以后不及复性12．复制起点；选择标识；克隆位点13．Ti质粒14．外源基因导入哺乳动物细胞
三、名词解释（每小题4分，共20分）
1．在基因工程中被操作DNA序列；又称外源基因（foreig
ge
eexoge
ousge
e，关键是指编码蛋白质结构基因（structuralge
e）；它们能够从自然界中已经有物种基因组ge
ome中分离出来，也能够用人工方法合成。2．根据大家意愿，进行严密设计，经过体外DNA重组和转基因等技术，有目标地改造生物种性，生产生物活性物质，甚至发明新物种技术。3．携带外源基因进入受体细胞DNA分子。4．Wester
印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上；然后用特异性抗体进行检测；可说明基因是否进行了表
f示。5．用标识探针检测出DNA或RNA同源序列技术；原理是碱基互补；常见有Souther
blot、Norther
blot和原位杂交。四、简答题（20分）1．目标基因制备；目标基因和载体连接；目标基因导入受体细胞；目标基因表示和检测。或：转、接、切、增、检（加以解释）。2．直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。（加以解释）五、试验和叙述题（20分）
①因为基因已被测序，可经过RTPCR方法克隆该基因；②也或经过基因文库分离法取得该基因；③基因能够在大肠杆菌中作为融合蛋白质或分泌蛋白质进行表示。具体操作以下：④制备目标基因；⑤连接到T载体；⑥转化大肠杆菌，提质粒；⑦测序；⑧酶切，回收目标基因，连接到原核表示载体；⑨再转化大肠杆菌，大量培养；⑩分离、纯化和检测r